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上海绘统光学仪器有限公司
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技术专栏
偏光显微镜物镜的鉴别率

物镜的鉴别率是指物镜具有将两个物点清晰分辨的最大能力,以两个物点能清晰分辨的最小距离d的倒数表示。d愈小,表示物镜的鉴别率愈高。

要明白鉴别率可以有一定的限度,这就要用光通过透镜后产生衍射现象来解释。物体通过光学仪器成象时,每一物点对应有一象点,但由于光的衍射,物点的象不再是一个几何点,而是有一定大小的衍射亮斑。靠近的两个物点所成的象一两个亮斑如果互相重叠,则导致这两个物点分辨不清,从而限制了光学系统的分辨本领一分辨率。显然,象面上衍射图象中央亮斑半径愈大,系统的分辨本领愈小。

瑞利(Rayleigh)提出一个推测(又称瑞利准则):认为当A1衍射花样的第一极小值正好落在A2衍射花样的极大值时,A1A2是可以分辨的,将此时定出的两物点距离A1A2作为光学统的分辨极限。θ0称为极限分辨角。不言而喻,当θθ0时是完全可分辨的,θθ0时是不可分辨的。

        由圆孔衍射理论得到:θ0=1.22λ / D

        式中λ──入射光波长;

             D──入射光的最大允许孔径(透镜直径)。

        因为θ0很小,所以由图2-4得:

                       d′≈θ0=1.22λS / D

        物镜在设计时,总是使它满足阿贝正弦条件的,即

                       ndsinu=n′d′sinu′

式中nn′为物、象所在空间的折射率,成象总是在空气介质中,故n′=1;u各u′分别为光线在物、象空间共轭点上的孔径角;d和d′分别为物点、象点中心斑的间距。

考虑到显微镜中入射光并非都是平行光,有倾斜光线,对上式系数作适当的修正,所以式中nsinu就是物镜的数值孔径,因此,上式或者写:d=0.5λ/N.A

因此表明:物镜的数值孔径愈大,入射光的波长愈短,则物镜的分辨能力愈高。在可见光中,观察时常用黄绿光(λ ≈4400A),则可使分辨能力提高25%左右

 

注意事项

1.搬动显微镜时,要一手握镜臂,一手扶镜座,两上臂紧靠胸壁。切勿一手斜提,前后摆动,以防镜头或其他零件跌落。

2.观察标本时,显微镜离实验台边缘应保持一定距离(5cm以上,至少一个横放着的拳头的宽度),以免显微镜翻倒落地。如使用镜筒直立式显微镜,镜柱与镜臂间的倾斜角度不得超过45度,以防重心后移、显微镜倾倒,用完立即还原。

3.使用显微镜时要严格按步骤操作,熟悉显微镜各部件性能,掌握粗、细调旋钮的转动方向与载物台升降关系。转动粗调旋钮向下时,眼睛必须注视物镜镜头。在镜检前要对所观察的目标物有个大致的判断。镜检必须有足够的耐心,必须将整个标本片仔仔细细的看完再下成功或失败的论断,除非有足够的理由或把握判断制片全砸了! 

4.观察带有液体的临时标本时要加盖玻片,不能使用倾斜关节,以免液体污染镜头。

5.粗、细调旋钮要配合使用,细调旋钮不能单方向过度旋转,调节焦距时,要从侧面注视载物台,以免压坏标本和镜头。

6.使用显微镜观察标本时,应双眼同时睁开、双手并用(左手操纵调焦旋钮,右手操纵标本移动器),应一边观察,一边记录绘图。

7.禁止随意拧开或调换目镜、物镜和聚光器等零件,以免丢失或损坏。目镜不能随便取出,以防灰尘落入镜筒内。

8.显微镜光学部件有污垢,可用擦镜纸或绸布擦净,切勿用手指、粗纸或手帕去擦,以防损坏镜面。

9.凡有腐蚀性和挥发性的化学试剂和药品,如碘、乙醇溶液、酸类、碱类等都不可与显微镜接触,如不慎污染时,应立即擦干净。

10.使用油镜观察样品后,随即用二甲苯将油镜镜头和载玻片擦净,以防其他的物镜玻璃上沾上香柏油。二甲苯有毒,使用后马上洗手。

11.实验完毕,要将载玻片取下,用擦镜纸将镜头擦拭干净。显微镜及时复原,处于非工作状态:物镜转离通光孔,载物台下降。最后将显微镜放回镜箱,登记使用记录。切不可把显微镜放在直射光线下曝晒。